DE10125365A1 - Microbial decomposition of xenobiotics, useful especially for degrading isoproturon, uses mixture of fungi with oxygenase and glutathione-S-transferase activities - Google Patents

Microbial decomposition of xenobiotics, useful especially for degrading isoproturon, uses mixture of fungi with oxygenase and glutathione-S-transferase activities

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Abstract

Method for decomposing xenobiotics (X) using a physiologically compatible combination of at least one fungus (A) with mono-/di-oxygenase activity and at least one fungus (B) with glutathione-S-transferase (GST) activity. An Independent claim is also included for a combination for decomposing (X) containing (A) and (B).

Description

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zum Abbau von Xenobiotika durch mindestens eine Pilzart mit Monooxygenase/Dioxygenase-Aktivität in Gegenwart mindestens einer Pilzart mit Glutathion-S-Transferase-Aktivität. Die Erfindung betrifft weiterhin eine Zusammensetzung aus den vorgenannten Pilzarten, sowie deren Verwendung zum Abbau von Xenobiotika.The invention relates to a process for the degradation of xenobiotics by at least one Fungus with monooxygenase / dioxygenase activity in the presence of at least one fungal species with glutathione-S-transferase activity. The invention further relates to a Composition from the aforementioned types of mushrooms, and their use for degradation of xenobiotics.

Ein Beispiel einer Gruppe von Pilzarten mit Monooxygenase-/Dioxygenase-Aktivität sind die sogenannten ligninabbauenden Pilze. Der Abbau von Lignin setzt das Vorhandensein einer Monooxygenase-/Dioxygenase-Aktivität voraus. Pilzarten, wie beispielsweise der Weißfäule-Pilz Phanerochaete chyrsosporium (ATCC 24725, ATCC 34541), besiedeln verholzte Pflanzenteile und kommen ubiquitär in den terrestrischen Agrar- und Waldökosystemen vor. Es ist bereits bekannt, dass diese Pilzarten eine Vielzahl von Xenobiotika entgiften können. So wurde beispielsweise der totale Entgiftungszyklus des Xenobiotikums 3,4-Dichloranilin bei P. chrysosporium bereits aufgeklärt, wobei die Xenobiotika-Entgiftungsprozesse durch Konjugation, Polymerisierung und Mineralisierung des aromatischen Rings eingeleitet werden können (5). Bei kürzlichen Versuchen mit dem beim Weizenanbau häufig verwendeten Herbizid Isoproturon wurde untersucht, in welchem Maße Pilzarten mit Monooxygenase-/Dioxygenase-Aktivität freies und Weizenzellwand gebundenes Isoproturon mineralisieren (8). Es wurde dabei herausgefunden, daß die Mineralisierung des aromatischen Rings von Xenobiotika, wie Isoproturon, durch Pilze voraussetzt, dass die Abbauenzyme der Monooxygenasen und/oder Dioxygenasen aktiviert sind. An example of a group of fungal species with monooxygenase / dioxygenase activity are the so-called lignin-degrading mushrooms. The breakdown of lignin exposes the presence a monooxygenase / dioxygenase activity. Mushroom species, such as the White rot fungus Phanerochaete chyrsosporium (ATCC 24725, ATCC 34541), colonize woody parts of plants and come ubiquitously in the terrestrial agricultural and Forest ecosystems. It is already known that these types of mushrooms have a variety of Can detoxify xenobiotics. For example, the total detoxification cycle of the Xenobiotic 3,4-dichloroaniline in P. chrysosporium has already been elucidated, whereby the Xenobiotic detoxification processes through conjugation, polymerization and Mineralization of the aromatic ring can be initiated (5). At recent Trying with the herbicide isoproturon commonly used in wheat growing investigated to what extent fungal species with monooxygenase / dioxygenase activity free Mineralize isoproturon bound to the wheat cell wall (8). It was there found that mineralization of the aromatic ring from xenobiotics, such as Isoproturon, by fungi, requires the breakdown enzymes of the monooxygenases and / or dioxygenases are activated.  

Nachteilig an der alleinigen Verwendung von Pilzen mit Monooxygenase-/Dioxygenase- Aktivität ist, daß die Abbaugeschwindigkeit - abhängig von der jeweiligen Xenobiotika- Art - relativ langsam und die Abbaurate relativ klein ist. Zudem muß der Abbau vorzugsweise im für den Pilz optimalen Temperaturbereich, der z. B. beim Weißfäulepilz Phanerochaete chyrsosporium 39°C beträgt, und in sauerstoffreichem Medium durchgeführt werden, was unter den in der Regel gegebenen Umweltbedingungen beinahe nie der Fall ist.Disadvantageous in using mushrooms with monooxygenase / dioxygenase alone Activity is that the rate of degradation - depending on the particular xenobiotics - Kind - relatively slow and the rate of degradation is relatively small. In addition, the dismantling preferably in the optimum temperature range for the mushroom, the z. B. in white rot Phanerochaete chyrsosporium is 39 ° C, and in an oxygen-rich medium be carried out, which almost under the usually given environmental conditions is never the case.

Im Gegensatz zu Pilzarten mit Monooxygenase-/Dioxygenase-Aktivität entgiften Pilzarten mit Glutathion-S-Transferase-Aktivität die Xenobiotika mittels Glutathion-S-Transferase.In contrast to mushroom species with monooxygenase / dioxygenase activity detoxify mushroom species with glutathione-S-transferase activity the xenobiotics by means of glutathione-S-transferase.

Zur Entgiftung von Grundwässern, die durch natürliche (biogeogene) S-haltige Substanzen verunreinigt sind, wie z. B. die H2S-Quelle bei Irnsing (Frankenalb, Deutschland), wie auch durch Industrie-/Bergbau-Schwefelabwässer kontaminiert sind, können Pilzarten der Klassen Basidiomycotina, Deuteromycotina oder Zygomycotina, z. B. Cephalosporium, Penicillium, Trichoderma und Mucor, mit Glutathion-S-Transferase-Aktivität eingesetzt werden (10). Einige umweltrelevante, S-haltige Komponenten sind z. B. H2S, Thiosulfat (S2O3 2-), Sulfit (SO3 2-), Dimethylsufid, Dimethyldisulfid, Methanthiol, Ethanthiol, Mercaptane, Dimethylsulfoxid. Es ist auch bekannt, dass Pilzarten mit Glutathion-S- Transferase-Aktivität, wie z. B. Mucor hiemalis, funktionelle Gruppen zur Biosorption von Chrom an die Zellwand besitzen (3).To detoxify groundwater that is contaminated by natural (biogeogenic) S-containing substances, such as B. the H 2 S source at Irnsing (Frankenalb, Germany), as well as contaminated by industrial / mining sulfur wastewater, mushrooms of the classes Basidiomycotina, Deuteromycotina or Zygomycotina, e.g. B. Cephalosporium, Penicillium, Trichoderma and Mucor, with glutathione-S-transferase activity can be used (10). Some environmentally relevant, S-containing components are e.g. B. H 2 S, thiosulfate (S 2 O 3 2- ), sulfite (SO 3 2- ), dimethyl sulfide, dimethyl disulfide, methanethiol, ethanethiol, mercaptans, dimethyl sulfoxide. It is also known that fungi with glutathione-S-transferase activity, such as. B. Mucor hiemalis, have functional groups for the biosorption of chromium on the cell wall (3).

Nachteilig an der alleinigen Verwendung von Pilzarten mit Glutathion-S-Transferase- Aktivität ist, daß durch Konjugation mit Glutathion keine totale Entgiftung (Mineralisierung) von Xenobiotika erreicht werden kann.Disadvantageous in the sole use of fungi with glutathione-S-transferase Activity is that by conjugation with glutathione there is no total detoxification (Mineralization) of xenobiotics can be achieved.

Neben dem Einzelbeitrag der Mikroorganismen zum Abbau bzw. zur Entgiftung von Xenobiotika sind auch mikrobielle Gemeinschaften beim Schadstoffabbau von Bedeutung, da die Schadstoffabbauleistungen der Gemeinschaften synergistisch verstärkt sein können.In addition to the individual contribution of microorganisms to the breakdown or detoxification of Xenobiotics are also important for microbial communities in pollutant degradation, because community pollutant removal performance can be synergistically enhanced.

In der Literatur wurde bereits vereinzelt über den Schadstoffabbau bakterieller Gemeinschaften berichtet. Nachteilig beim Einsatz bakterieller Gemeinschaften ist jedoch, daß diese in mancher Hinsicht gegenüber eukaryotischen Pilze bezüglich des Xenobiotika- Abbaues unterlegen sind, da die Pilze eine breitere Xenobiotika-Substratspezifität als die Bakterien besitzen, und somit in der Regel besser als Bakterien die Schadstoffgemische entgiften können. Zudem können aquatische Pilzarten, zumindest im oberflächennahen, sauerstoffreichen Grundwasser, effiziente Beiträge zur Schadstoffentgiftung leisten. Manche Pilzarten sind fakultativ anaerob, und somit können sie in den tieferen geologischen Schichten, sogar in Sporenform (1), auch bezüglich der Schadstoffentgiftung aktiv sein.In the literature, there has already been isolated bacterial degradation Communities reported. However, the disadvantage of using bacterial communities is that that these are in some respects compared to eukaryotic fungi regarding the xenobiotic  Degradation are inferior because the fungi have a broader xenobiotic substrate specificity than that Bacteria possess, and therefore generally better than bacteria, the pollutant mixtures can detoxify. In addition, aquatic mushroom species, at least close to the surface, oxygen-rich groundwater, make efficient contributions to pollutant detoxification. Some types of mushrooms are facultative anaerobic, and so they can be in the deeper geological layers, even in spore form (1), also with regard to the detoxification of pollutants be active.

Bis zum jetzigen Zeitpunkt ist jedoch sehr wenig über die Schadstoffabbauleistung der pilzlichen Gemeinschaften bekannt geworden.So far, however, very little is known about the pollutant degradation performance of the became known to fungal communities.

Es ist daher die Aufgabe der vorliegenden Erfindung, ein Verfahren und eine Zusammensetzung zum Abbau von Xenobiotika durch Mikroorganismen bereitzustellen, durch das eine erhöhte Abbauleistung von Xenobiotika in einer kürzeren Zeitspanne und in einem breiten Temperaturbereich erreicht werden kann und zusätzlich ein breites Spektrum an Xenobiotika entgiftet werden kann.It is therefore the object of the present invention, a method and a To provide a composition for the degradation of xenobiotics by microorganisms, due to the increased degradation performance of xenobiotics in a shorter period of time and in a wide temperature range can be achieved and also a wide range of xenobiotics can be detoxified.

Diese Aufgabe wird durch die in Patentanspruch 1, 14 und 21 angegebenen Merkmale gelöst. Weitere vorteilhafte Ausgestaltungen der Erfindung sind in den Unteransprüchen angegeben.This object is achieved by the features specified in patent claims 1, 14 and 21 solved. Further advantageous embodiments of the invention are in the subclaims specified.

Es hat sich überraschenderweise herausgestellt, daß der Xenobiotikaabbau durch Pilzarten mit Monooxygenase-/Dioxygenase-Aktivität in Gegenwart von Pilzarten mit Glutathion-S- Transferase-Aktivität elicitiert wurde. Unter Elicitierung wird im vorliegenden Zusammenhang die Verstärkung der metabolischen Aktivität bzw. des metabolischen Signals eines biologischen Systems durch die Anwesenheit eines Teilsystems/des Gesamtsystems eines anderen Organismus verstanden.It has surprisingly been found that the xenobiotic degradation by fungus species with monooxygenase / dioxygenase activity in the presence of fungi with glutathione-S- Transferase activity was elicited. Elicitation is used in the present Relationship between the enhancement of the metabolic activity or the metabolic Biological system signal due to the presence of a subsystem / Entire system of another organism understood.

Bei einem gemeinschaftlichen Einsatz zeigte sich, daß die Xenobiotika-Abbaugene bzw. - enzyme bei durch Pilzarten mit Monooxygenase-/Dioxygenase-Aktivität durch Pilzarten mit Glutathion-S-Transferase-Aktivität elicitiert wurden. Bei diesen, durch die entsprechenden Gene exprimierten Enzymen, handelt sich um die wichtigsten pilzlichen Entgiftungsenzyme, nämlich die Cytochrom P450 Isoenzyme (z. B. Dealkylase, Hydroxylase). Umgekehrt ist es möglich, daß Pilzarten mit Monooxygenase/Dioxygenase- Aktivitäten Schadstoffabbaugene bzw. -enzyme von Pilzarten mit Glutathion-S- Transferase-Aktivität stimulieren. Die einzige Voraussetzung, die bei Kombination von Pilzarten der beiden vorgenannten Gruppen zu beachten ist, ist deren physiologische Kompatibilität. Diese Kompatibilität kann durch einfache Maßnahmen festgestellt werden, beispielsweise dadurch, dass beide Pilzarten auf festem Malzextrakt-Agar (2/1, w/w)- Medium keine Trennlinien (demarcation line) bilden und keine starke Reaktionen (Flüssigkeitströpfchenbildung) auf der Myzeloberfläche zeigen (siehe Abb. 1).When used together, it was found that the xenobiotic degrading genes or enzymes in fungi with monooxygenase / dioxygenase activity were elicited by fungi with glutathione-S-transferase activity. These enzymes, which are expressed by the corresponding genes, are the most important fungal detoxification enzymes, namely the cytochrome P450 isoenzymes (e.g. dealkylase, hydroxylase). Conversely, it is possible for fungal species with monooxygenase / dioxygenase activities to stimulate pollutant degradation or enzymes from fungal species with glutathione-S-transferase activity. The only prerequisite to be considered when combining mushroom species from the two aforementioned groups is their physiological compatibility. This compatibility can be determined by simple measures, for example by the fact that both types of fungus on solid malt extract agar (2/1, f / w) medium do not form any demarcation line and do not show any strong reactions (liquid droplet formation) on the mycelium surface ( see Fig. 1).

Als Pilzarten mit Monooxygenase-/Dioxygenase-Aktivität werden erfindungsgemäß insbesondere die Pilzarten Trametes versicolor, Pleurotus ostreatus oder Phanerochaete chrysosporium eingesetzt. Die Pilzart Phanerochaete chrysosporium zeigte dabei bei der gemeinsamen Verwendung mit Pilzarten mit Glutathion-S-Transferase-Aktivität besonders gute Entgiftungseigenschaften.According to the invention, mushroom types with monooxygenase / dioxygenase activity are used especially the mushroom types Trametes versicolor, Pleurotus ostreatus or Phanerochaete chrysosporium used. The fungus species Phanerochaete chrysosporium showed in the common use with fungal species with glutathione-S-transferase activity especially good detoxification properties.

Erfindungsgemäß finden als Pilzarten mit Glutathion-S-Transferase-Aktivität insbesondere die Pilzarten der oben erwähnten Klassen Basidiomycotina, Deuteromycotina oder Zygomycotina, z. B. Cephalosporium, Penicillium, Trichoderma und Mucor, Anwendung. Unter diesen hat sich die Pilzart Mucor hiemalis f. irnsingii (DSM 14200) als besonders vorteilhaft erwiesen. Im Gegensatz zu Mucor hiemalis f. hiemalis, der die Pflanzenteile saprophytisch besiedelt, wurde der Pilz Mucor hiemalis f. irnsingii (DSM 14200) aus H2S- Quellwässern isoliert (7), d. h., er verträgt außerdem H2S. Dieser Aspekt ist von Bedeutung, da unter aeroben Bedingungen schwefelhaltige Kontaminationen häufig schlecht durch die Mikroorganismen abgebaut bzw. entgiftet werden. Die Pilzart Mucor hiemalis f. irnsingii verträgt zudem mehr als 500 ppm Natriumthiosulfat.According to the invention, the types of fungi of the above-mentioned classes Basidiomycotina, Deuteromycotina or Zygomycotina, for example, fungi with glutathione-S-transferase activity. B. Cephalosporium, Penicillium, Trichoderma and Mucor, application. Among these, the Mucor hiemalis f. irnsingii (DSM 14200) proved to be particularly advantageous. In contrast to Mucor hiemalis f. hiemalis, which saprophytically colonizes the parts of the plant, the Mucor hiemalis f. irnsingii (DSM 14200) isolated from H 2 S spring water (7), ie it also tolerates H 2 S. This aspect is important because under aerobic conditions sulfur-containing contaminations are often poorly broken down or detoxified by the microorganisms. The Mucor hiemalis f. irnsingii also tolerates more than 500 ppm sodium thiosulfate.

Das erfindungsgemäße Verfahren hat sich insbesondere beim Abbau des Herbizids Isoproturon als vorteilhaft herausgestellt. Durch den vorstehend beschriebenen Effekt der wechselseitigen Elicitierung der Entgiftungsenzyme von Pilzarten mit Monooxygenase- /Dioxygenase-Aktivität und Pilzarten mit Glutathion-S-Transferase-Aktivität kommt es in weit kürzerer Zeit zu einem vollständigen Abbau des Herbizids. Durch den synergistischen Effekt kommt es zu einer Aktivierung der Abbauenzyme, die für einen schnelleren und vollständigeren Abbau der Substanz verantwortlich sind. Zu den erfindungsgemäß abbaubaren Xenobiotika gehören beispielsweise PAK's (polyzyklische aromatische Kohlenwasserstoffe), PCB's (polychlorierte Biphenyle), Dioxine, Furane, BTX (Benzol-, Toluol- und Xylol)-Verbindungen, Sprengstoffe, DDT, 3,4-Dichloranilin, Azofarbstoffe, Lindane, PCP (Pentachlorphenol), sowie deren gebundene Xenobiotika. Darüberhinaus können andere Xenobiotika, die durch den kompatiblen Pilzpartner, d. h. Pilzarten mit Glutathion-S-Transferase, detoxifizierbar sind, grundsätzlich effizient abgebaut bzw. entgiftet werden. Deswegen deckt das erfindungsgemäße Abbauverfahren weitere toxische Schadstoffe, z. B. Schwermetalle, Klärabfälle, ölhaltige Kontaminationen, in unterschiedlichen extremen Umgebungen ab.The method according to the invention has been found in particular in the degradation of the herbicide Isoproturon turned out to be advantageous. Due to the effect of mutual elimination of the detoxification enzymes of fungal species with monooxygenase / Dioxygenase activity and fungi with glutathione-S-transferase activity come in far less time to complete degradation of the herbicide. Through the synergistic The effect of this is that the breakdown enzymes are activated for a faster and faster more complete breakdown of the substance are responsible. To the invention  Degradable xenobiotics include PAHs (polycyclic aromatic Hydrocarbons), PCB's (polychlorinated biphenyls), dioxins, furans, BTX (benzene, Toluene and xylene) compounds, explosives, DDT, 3,4-dichloroaniline, azo dyes, Lindane, PCP (pentachlorophenol), and their bound xenobiotics. Furthermore other xenobiotics released by the compatible fungal partner, i.e. H. Mushroom species with Glutathione-S-transferase, which are detoxifiable, are efficiently broken down or be detoxified. For this reason, the degradation process according to the invention covers other toxic ones Pollutants, e.g. B. heavy metals, sewage waste, oil-containing contaminants, in different extreme environments.

Das erfindungsgemäße Verfahren kann in einem Temperaturbereich von 0,3 bis 50 Grad Celsius durchgeführt werden. Dies mag zunächst erstaunen, da beispielsweise P. chyrsosporium bei Raumtemperatur relativ langsam wächst bzw. sporuliert, und das Lignin im Holzteil bei einem Temperaturoptimum der Mineralisierung in sauerstoffreichen Medien bei 39°C mineralisiert (5). Darin liegt auch einer der bedeutendsten Nachteile seines alleinigen Einsatzes, der relativ hohe Temperaturen erforderlich macht. Durch die erfindungsgemäße Kombination zumindest einer Pilzart mit Monooxygenase- /Dioxygenase-Aktivität und zumindest einer Pilzart mit Glutathion-S-Transferase-Aktivität tritt die vorteilhafte Situation ein, daß über die Stoffwechselstimulierung das Temperaturoptimum für den Schadstoffabbau der einzelnen Partner nach unten gesenkt werden kann. Dies wird durch das folgende Beispiel veranschaulicht:
Das Temperaturoptimum des Wachstums von Phanerochaete chyrsosporium liegt bei 39°C, Mucor hiemalis f. irnsingii wächst und sporuliert auf Malz-Extrakt-Agar noch unterhalb der Grundwassertemperatur, z. B. bei 5°C. Es hat sich gezeigt, dass eine Kombination der beiden vorgenannten Pilzarten eine Abbauleistung bei noch niedrigeren Temperaturen von bis zu 0,3°C zeigt.The method according to the invention can be carried out in a temperature range from 0.3 to 50 degrees Celsius. This may be surprising at first, since P. chyrsosporium grows or sporulates relatively slowly at room temperature, and the lignin in the wood part mineralizes at an optimum temperature of mineralization in oxygen-rich media at 39 ° C (5). This is also one of the most significant disadvantages of using it alone, which requires relatively high temperatures. The combination according to the invention of at least one type of mushroom with monooxygenase / dioxygenase activity and at least one type of mushroom with glutathione-S-transferase activity results in the advantageous situation that the temperature optimum for the degradation of pollutants of the individual partners can be reduced downward by stimulating the metabolism. This is illustrated by the following example:
The optimum temperature for the growth of Phanerochaete chyrsosporium is 39 ° C, Mucor hiemalis f. irnsingii grows and sporulates on malt extract agar even below the groundwater temperature, e.g. B. at 5 ° C. It has been shown that a combination of the two aforementioned types of mushrooms shows a degradation performance at even lower temperatures of up to 0.3 ° C.

Das vorliegende Verfahren kann daher beispielsweise bei Raumtemperatur durchgeführt werden bzw. die Zusammensetzung kann bei diesen Temperaturen eingesetzt werden. Weiterhin ist es möglich, die Medientemperatur auf Grundwassertemperatur zu senken und dadurch einen Xenobiotika-Abbau in tieferen Sedimentschichten durch Zusammenwirken der erfindungsgemäßen Pilzarten zu erreichen bzw. die Mineralisierungsdauer zu verkürzen.The present method can therefore be carried out, for example, at room temperature or the composition can be used at these temperatures. It is also possible to reduce the media temperature to groundwater temperature and thereby a xenobiotic degradation in deeper sediment layers through interaction  to achieve the mushroom types according to the invention or the mineralization duration shorten.

Gemäß einer bevorzugten Ausführungsform wird das erfindungsgemäße Verfahren in C- und/oder N-Mangelmedien durchgeführt. Grundsätzlich kann das erfindungsgemäße Verfahren/Zusammensetzung auch in C-,N-reichen Medien durchgeführt/eingesetzt werden. Es hat sich jedoch herausgestellt, daß der Abbau von Xenobiotika in C- und N- Mangelmedien eine überlegene Abbaugeschwindigkeit/-Rate zur Folge hatte. Hierbei wurde festgestellt, daß in C-Mangelmedien der maximale Abbau von Xenobiotika, wie beispielsweise Isoproturon, im Vergleich zu N-Mangelmedien ca. 3 Tage verspätet auftrat. Ein wichtiger Grund dafür ist wahrscheinlich die metabolische Abhängigkeit des Aminosäure (N-haltig, z. B. Glutamat)-Zyklus vom Zitronensäurezyklus, wobei Acetyl- CoA von der C-Quelle (Kohlenhydrat, Fette, organische Schadstoffe) zum Citronensäurezyklus eingespeist und später z. T. in Aminosäure wie bei einem 1 : 1- Zahnradsystem umgesetzt wird. Deswegen ist neben Belüftung der Grundwässer die gezielte Steuerung des C-/N-Verhältnisses (Mittelwert von vorhandenen Nährstoffen und vom Schadstoff) von Vorteil.According to a preferred embodiment, the process according to the invention is carried out in C and / or N-deficiency media. Basically, the invention Process / composition also carried out / used in C, N-rich media become. However, it has been found that the breakdown of xenobiotics in C- and N- Deficient media resulted in a superior degradation rate / rate. in this connection it was found that in C-deficient media the maximum breakdown of xenobiotics, such as For example, isoproturon, which was about 3 days late in comparison to N-deficient media. An important reason for this is probably the metabolic dependence of the Amino acid (N-containing, e.g. glutamate) cycle from the citric acid cycle, with acetyl CoA from the C source (carbohydrate, fats, organic pollutants) to Citric acid cycle fed and later z. T. in amino acid as in a 1: 1- Gear system is implemented. That is why in addition to aeration of the groundwater targeted control of the C / N ratio (mean value of available nutrients and from the pollutant) an advantage.

Darüber hinaus kann eine dementsprechende Zusammensetzung zur Entgiftung von Schadstoffen beispielsweise in Kläranlagen, von Abwässern, Müll, Ackerböden, Flugaschen, Industrieböden und Industrieluft verwendet werden.In addition, a corresponding composition for detoxification of Pollutants, for example in sewage treatment plants, sewage, garbage, arable land, Fly ash, industrial floors and industrial air can be used.

Nachfolgend wird die Erfindung anhand der beiliegenden Abbildungen näher beschrieben. Die Abbildungen zeigen:The invention is described in more detail below with reference to the accompanying figures. The pictures show:

Abb. 1 Kompatibilitätstest von P. chrysosporium mit Mucor hiemalis f. irnsingii auf Malz-Extrakt-Agar (3 : 1, w/w). Fig. 1 Compatibility test of P. chrysosporium with Mucor hiemalis f. irnsingii on malt extract agar (3: 1, w / w).

Abb. 2 Mögliche Angriffsstellen am Isoproturon durch die pilzlichen Entgiftungsenzyme (Pc: Phanerochaete chrysosporium; Mh: Mucor hiemalis f. irnsingii). Fig. 2 Possible sites of attack on the isoproturon by the fungal detoxification enzymes (Pc: Phanerochaete chrysosporium; Mh: Mucor hiemalis f. Irnsingii).

Abb. 3 Metabolismus von [ring-14C-UL]-Isoproturon (1,8 µCi; 0,4 ppm) mit nichtmarkiertem Isoproturon (Gesamtkonzentration: 30,4 ppm) in C-limitierten (C-lim) und N-limitierten (N-lim) Flüssigmedien nach zunehmender Versuchsdauer. Fig. 3 Metabolism of [ring- 14 C-UL] isoproturon (1.8 µCi; 0.4 ppm) with unlabeled isoproturon (total concentration: 30.4 ppm) in C-limited (C-lim) and N-limited (N-lim) liquid media after increasing test duration.

Abb. 4 Elicitierung des Abbaues von freiem Isoproturon (1,8 µCi [ring-14C-UL]- Isoproturon + nichtmarkiertes Isoproturon; Gesamtkonz. 30,4 ppm) durch P. chrysosporium in Gegenwart von Mucor hiemalis f. irnsingii in N-Mangelmedien Fig. 4 Elimination of the degradation of free isoproturon (1.8 µCi [ring- 14 C-UL] - isoproturon + unlabelled isoproturon; total concentration 30.4 ppm) by P. chrysosporium in the presence of Mucor hiemalis f. irnsingii in N-deficient media

BeispieleExamples

Im Folgenden wird das erfindungsgemäße Verfahren anhand der Kombination der ligninabbauenden Pilzart P. chrysosporium und der Pilzart Mucor hiemalis f. irnsingii, die eine hohe Glutathion-S-Transferase-Aktivität aufweist, verdeutlicht.The method according to the invention is described below using the combination of lignin-degrading mushroom type P. chrysosporium and the mushroom type Mucor hiemalis f. irnsingii, the has a high glutathione-S-transferase activity.

Die Angaben über Material und Methoden sind teilweise direkt in den Legenden enthalten. Die Experimente zur Mineralisierung von Isoproturon (IPU) wurden analog wie bei 3,4- Dichloranilin nach (5) durchgeführt. Die Kultivation von P. chrysosporium in Gegenwart von Mucor hiemalis f. irnsingii in N-limitierten, C-limitierten und C-,N-reichen Flüssigmedien erfolgte nach (7). Für weitere Angaben wird auf den Inhalt der entsprechenden Publikationen verwiesen. Bezüglich der Angaben zur Isolierung und Identifizierung der Pilzstämme von Mucor hiemalis f. irnsingii wird auf den Inhalt der Veröffentlichung (6) Bezug genommen.Some of the information about materials and methods is included in the legends. The experiments on mineralization of isoproturon (IPU) were carried out analogously to Dichloraniline carried out according to (5). The cultivation of P. chrysosporium in the present by Mucor hiemalis f. irnsingii in N-limited, C-limited and C-, N-rich Liquid media was carried out according to (7). For further information, please refer to the content of the related publications. Regarding insulation and Identification of the Mucor hiemalis f. irnsingii is based on the content of the Publication (6) Referenced.

Verträglichkeitstest der Pilzarten P. chrysosporium und Mucor hiemalis f. irnsingiiCompatibility test of the fungus species P. chrysosporium and Mucor hiemalis f. irnsingii

Die Abb. 1 zeigt, dass die Myzel von P. chrysosporium keine starke Demarkationslinie mit M. hiemalis am Myzelberührungspunkt bildet. Damit sind die beiden Pilzarten physiologisch kompatibel. In Flüssigkeiten können sie zusammen Pellets bzw. Biofilme bilden. Die Hyphen und Pilzsporen von beiden Pilzarten zeigten das Vorkommen von Chitin auf der Oberfläche (6). Fig. 1 shows that the mycelium of P. chrysosporium does not form a strong demarcation line with M. hiemalis at the point of contact with the mycelium. This makes the two types of fungus physiologically compatible. In liquids, they can form pellets or biofilms together. The hyphae and fungal spores of both types of fungus showed the presence of chitin on the surface (6).

Entgiftungsenzyme der Pilzarten P. chrysosporium und Mucor hiemalis f. irnsingii P. chrysosporium-EntgiftungsenzymeDetoxification enzymes of the fungus types P. chrysosporium and Mucor hiemalis f. irnsingii P. chrysosporium detoxification enzymes

Die folgenden Entgiftungsenzymsysteme wurden bei P. chrysosporium festgestellt: Ligninase (5), Arylacylamidase (5) und auch α-Ketoglutaryl-CoA-Ligase und Monooxygenasen wie Cytochrom P-450 Isoenzyme und/oder Dioxygenasen wie 3,4- Dichloranilinsuccinimid Dioxygenasen (5) und Isoproturon Dioxygenasen (vgl. unten). Es wurde nur eine schwache Glutathion-S-Transferase-Aktivität beim Weißfäule-Pilz P. chrysosporium festgestellt (5). Neben der totalen Entgiftung von Xenobiotika durch die Mineralisierung mittels P. chrysosporium wurden auch die Entgiftungswege durch Polymerisierung, und durch Konjugation, z. B. 3,4-Dichloranilin mit α-Ketoglutarsäure, aber gering mit Glutathion (siehe oben), bereits beschrieben (5).The following detoxification enzyme systems have been found in P. chrysosporium: Ligninase (5), arylacylamidase (5) and also α-ketoglutaryl-CoA ligase and Monooxygenases such as cytochrome P-450 isoenzymes and / or dioxygenases such as 3,4- Dichloraniline succinimide dioxygenases (5) and isoproturon dioxygenases (see below). It only weak glutathione-S-transferase activity in white rot fungus P. chrysosporium found (5). In addition to the total detoxification of xenobiotics by the Mineralization using P. chrysosporium was also followed by the detoxification pathways Polymerization, and by conjugation, e.g. B. 3,4-dichloroaniline with α-ketoglutaric acid, but low with glutathione (see above), already described (5).

Mucor hiemalis f. irnsingii-EntgiftungsenzymeMucor hiemalis f. irnsingii detoxification enzymes

Es wurde bereits berichtet, dass Mucor hiemalis f. irnsingii die im Mikroorganismenreich höchst bekannte Glutathion-S-Transferase-Aktivität gegenüber Fluoridifen besitzt (6). Dagegen ist die in vivo Aktivität von Cytochrom P-450 Isoenzymen bzw. Dioxygenasen sehr gering bei dieser Pilzart (vgl. unten). Die Angriffswege der Entgiftung von Xenobiotika mittels Glutathion-S-Transferase bei Mucor hiemalis f. irnsingii sind 1) nukleophile Substitution des Chloratoms mit Glutathion, z. B. bei Atrazin, Propachlor, Pretilachlor, Chlorimuron, 2) Anlagerung von Glutathion via Etherbindungsspaltung, z. B. in Fluoridifen, Acifluorfen, 3) Anlagerung von Glutathion via Sulfoxidspaltung, z. B. bei EPTC und Metribuzin, und 4) Addition von Glutathion an Epoxid, z. B. bei Tridiphan (9). Obwohl durch Konjugation mit Glutathion keine totale Entgiftung (Mineralisierung) erreicht wird, können die diversen Xenobiotika bzw. ihre Metabolite, wo Angriff mittels Glutathion-S-Transferase ermöglicht wird, durch die Konjugation mit Glutathion eine Zunahme der Polarität und der zellulären Exkretion, und damit verbunden die Reduktion der Toxizität und der zellulären Wiederaufnahme bzw. die Verstärkung weiterer enzymatischer Verarbeitung mittels anderer Entgiftungsenzyme, z. B. Monooxygenasen/­ Dioxygenasen effizient erreicht werden. It has already been reported that Mucor hiemalis f. irnsingii those in the microorganism kingdom has well-known glutathione-S-transferase activity against fluoridifene (6). In contrast, the in vivo activity of cytochrome P-450 isoenzymes or dioxygenases very low with this type of mushroom (see below). The ways of detoxification Xenobiotics using glutathione-S-transferase in Mucor hiemalis f. irnsingii are 1) nucleophilic substitution of the chlorine atom with glutathione, e.g. B. at atrazine, propachlor, Pretilachlor, chlorimuron, 2) addition of glutathione via ether bond cleavage, e.g. B. in fluoridifen, acifluorfen, 3) addition of glutathione via sulfoxide cleavage, e.g. B. at EPTC and metribuzin, and 4) addition of glutathione to epoxy, e.g. B. at Tridiphan (9). Although no total detoxification (mineralization) through conjugation with glutathione is achieved, the various xenobiotics or their metabolites, where attack by means of Glutathione-S-Transferase is made possible by conjugation with glutathione Increase in polarity and cellular excretion, and associated reduction the toxicity and cellular reuptake or the enhancement of others enzymatic processing using other detoxification enzymes, e.g. B. monooxygenases / Dioxygenases can be achieved efficiently.  

Die Abb. 2 zeigt hypothetisch die möglichen Angriffsstellen bzw. Angriffssequenzen hinsichtlich des Abbaues von Isoproturon in Dualkulturen von P. chrysosporium und M. hiemalis f. irnsingii. Fig. 2 shows hypothetically the possible points of attack or attack sequences with regard to the degradation of isoproturon in dual cultures of P. chrysosporium and M. hiemalis f. irnsingii.

In vivo Abbau von Isoproturon durch Phanerochaete chrysosporium und Mucor hiemalis f. irnsingiiIn vivo degradation of isoproturon by Phanerochaete chrysosporium and Mucor hiemalis f. irnsingii P. chrysosporiumP. chrysosporium

Es wurde gezeigt, dass der Weißfäule-Pilz P. chrysosporium freie und Weizenzellwand- gebundenes Isoproturon bis zu 22% bzw. 13% in 25 Tagen in sauerstoffreichen N-Mangel- Medien bei 39°C mineralisiert (8). Bei der Entgiftung von Weizenzellwand-gebundenem Isoproturon war die Isoproturon-Solubilisierungsleistung von P. chrysosporium aus der unlöslichen Weizenzellwand bemerkenswert hoch.It has been shown that the white rot fungus P. chrysosporium free and wheat cell wall bound isoproturon up to 22% or 13% in 25 days in oxygen-rich N deficiency Media mineralized at 39 ° C (8). In the detoxification of wheat cell wall-bound Isoproturon was the isoproturon solubilization performance of P. chrysosporium from the insoluble wheat cell wall remarkably high.

Mucor hiemalis f. irnsingiiMucor hiemalis f. irnsingii

Die Voruntersuchungen mit [ring-14C-UL]-Isoproturon haben gezeigt, dass der Pilz Mucor hiemalis f. irnsingii kaum Isoproturon, wie auch theoretisch überlegt wurde (Abb. 2), in vivo in N-Mangel, C-Mangel und C-,N-reichen sauerstoffreichen Flüssigmedien bei ca. 20°C und 70 UpM-Schüttelfrequenz abbaut. Dieses Ergebnis konnte sogar bei noch höherer Temperatur, z. B. bei 39°C, bestätigt werden (vgl. unten).The preliminary investigations with [ring- 14 C-UL] -isoproturon have shown that the fungus Mucor hiemalis f. irnsingii hardly isoproturon, as was also theorized ( Fig. 2), degrades in vivo in N-deficiency, C-deficiency and C-, N-rich oxygen-rich liquid media at approx. 20 ° C and 70 rpm shaking frequency. This result could be achieved even at an even higher temperature, e.g. B. at 39 ° C, be confirmed (see below).

Um den Abbau von Isoproturon durch Phanerochaete chrysosporium in Gegenwart von Mucor hiemalis f. irnsingii untersuchen zu können, wurde der folgende Versuch bei 39°C und Schüttelfrequenz 70 UpM in sauerstoffreichen Flüssigmedien vorgenommen. Zunächst wurden die Sporen von Mucor hiemalis f. irnsingii, Isolat phänotypisch "hellbraun", appliziert, dann die Sporen von Mucor hiemalis f. irnsingii, Isolat phänotypisch "dunkel (melanisiert)", und zuletzt die Sporen von P. chrysosporium appliziert. Die Sporenkeimung und die Pelletbildung dauerte bis zum darauffolgenden 3. Tag (siehe Abb. 3). Mittels dieses Versuchs konnte die in vivo Elicitierung des Isoproturon-Abbaus durch P. chysosporium in Gegenwart von Mucor hiemalis f. irnsingii in N-Mangel, C-Mangel und C-,N-reichen Medien in Abhängigkeit der Sporenzugabe in unterschiedlichen Nährstoffausstattungen untersucht werden. In C-,N-reichen Medien wurde ein geringerer Abbau von Isoproturon durch P. chrysosporium in Gegenwart von Mucor hiemalis f. irnsingii bis zum 31. Tag festgestellt. In C-Mangelmedien trat der maximale Abbau von Isoproturon im Vergleich zu N-Mangelmedien ca. 3 Tage verspätet auf. Es scheint auch, dass in C-limitierten Medien die Metabolisierung von Isoproturon im Vergleich zu N- limitierten Medien etwas anders abläuft (vgl. Abb. 3). Der in C-limitierten Medien gebildete Metabolit "Met2" war polarer als der in N-Mangelmedien gebildete Metabolit "Met1". Neben Met1 trat auch Met2 in N-limitierten Medien in geringen Mengen auf. Der Metabolit "Met1" wurde vorläufig als Hydroxy-Monodesmethyl-IPU und "Met2" als Hydroxy-Didesmethyl-IPU zugeordnet. In der Kontrolle (C-,N-reiche Medien ohne Pilz), wie erwartet, wurde kein Umsatz von Isoproturon beobachtet.In order to break down isoproturon by Phanerochaete chrysosporium in the presence of Mucor hiemalis f. irnsingii, the following experiment was carried out at 39 ° C and shaking frequency 70 rpm in oxygen-rich liquid media. First, the spores of Mucor hiemalis f. irnsingii, isolate phenotypically "light brown", applied, then the spores of Mucor hiemalis f. irnsingii, isolate phenotypically "dark (melanized)", and finally the spores of P. chrysosporium applied. Spore germination and pellet formation continued until the following third day (see Fig. 3). Using this experiment, the in vivo elimination of isoproturon degradation by P. chysosporium in the presence of Mucor hiemalis f. irnsingii in N-deficiency, C-deficiency and C-, N-rich media depending on the spore addition can be investigated in different nutrient configurations. In C-, N-rich media, less degradation of isoproturon by P. chrysosporium in the presence of Mucor hiemalis f. irnsingii found until day 31. In C-deficient media, the maximum degradation of isoproturon was delayed by about 3 days compared to N-deficient media. It also appears that the metabolism of isoproturon is somewhat different in C-limited media compared to N-limited media (see Fig. 3). The metabolite "Met2" formed in C-limited media was more polar than the metabolite "Met1" formed in N-deficient media. In addition to Met1, Met2 also appeared in small quantities in N-limited media. The metabolite "Met1" was provisionally assigned as Hydroxy-Monodesmethyl-IPU and "Met2" as Hydroxy-Didesmethyl-IPU. In the control (C, N-rich media without fungus), as expected, no conversion of isoproturon was observed.

Elicitierung der Mineralisierung von freiem Isoproturon durch Phanerochaete chrysosporium in Gegenwart von Mucor hiemalis f. irnsingii in N-MangelmedienElimination of mineralization of free isoproturon by phanerochaete chrysosporium in the presence of Mucor hiemalis f. irnsingii in N-deficient media

Die Abb. 4 zeigt, dass die Gesamtradioaktivität im Medium sowie die Radioaktivität von [ring-14C-UL]-Isoproturon (Gesamtkonzentration: ca. 30,4 ppm) im Medium und geringfügig nach der ersten Applikation von Sporen aus Mucor hiemalis f. irnsingii, Stamm "hellbraun", abnimmt. Die zweite Applikation von Sporen aus Mucor hiemalis f. irnsingii, Stamm "dunkel (melanisiert)", zeigte etwas mehr Abbau von Isoproturon, aber immer noch gering. Eine dramatische Erhöhung des Abbaues von Isoproturon konnte erst nach der Applikation von Phanerochaete chrysosporium-Sporen beobachtet werden. Innerhalb eines Tages nach der Sporenkeimung und der Pelletbildung verschwand Isoproturon, dafür traten die Metaboliten Met1 und Met2, insbesondere Met1, auf und außerdem stieg simultan, sogar während der Sporenkeimung, die Bildung von 14CO2. Innerhalb der nächsten 10 Tage wurde mehr als 30% Isoproturon in N-Mangelmedien mineralisiert. In diesem Falle kann man von Elicitierung des Abbaues von Isoproturon durch P. chrysosporium in Gegenwart von Mucor hiemalis f. irnsingii sprechen, da sonst Isoproturon nur bis zu 22%, aber erst in 25 Tagen, durch Phanerochaete chrysosporium alleine, also ohne Mucor hiemalis f. irnsingii, mineralisiert wird (8). Fig. 4 shows that the total radioactivity in the medium and the radioactivity of [ring- 14 C-UL] isoproturon (total concentration: approx. 30.4 ppm) in the medium and slightly after the first application of spores from Mucor hiemalis f. irnsingii, trunk "light brown", decreases. The second application of spores from Mucor hiemalis f. irnsingii, strain "dark (melanized)", showed a little more degradation of isoproturon, but still little. A dramatic increase in the breakdown of isoproturon could only be observed after the application of Phanerochaete chrysosporium spores. Within a day after spore germination and pellet formation, isoproturon disappeared, but the metabolites Met1 and Met2, especially Met1, appeared and, in addition, the formation of 14 CO 2 increased simultaneously, even during spore germination. Over the next 10 days, more than 30% isoproturon was mineralized in N-deficient media. In this case, elimination of the degradation of isoproturon by P. chrysosporium in the presence of Mucor hiemalis f. speak irnsingii, otherwise isoproturon only up to 22%, but only in 25 days, through Phanerochaete chrysosporium alone, i.e. without Mucor hiemalis f. irnsingii, is mineralized (8).

Zusammengefasst kann der ubiquitär vorkommende Weißfäule-Pilz P. chrysosporium folglich freies und Weizenzellwand gebundenes Isoproturon bis zu 22% bzw. 13% in 25 Tagen mineralisieren (8). Diese Abbaurate bzw. Mineralisierung von Isoproturon durch P. chrysosporium kann durch die Elicitierung durch Mucor hiemalis f. irnsingii sogar bei einer relativ sehr hohen Konzentration (30,4 ppm ≈ 148,29 µM) im Vergleich zu einer früheren Studie (0,61 µM Isoproturon; (8)) noch weiter auf < 30% erhöht werden.In summary, the ubiquitous white rot fungus P. chrysosporium consequently free and wheat cell wall bound isoproturon up to 22% and 13% in 25  Mineralize days (8). This rate of degradation or mineralization of isoproturon by P. chrysosporium can be elicited by Mucor hiemalis f. irnsingii even at a relatively very high concentration (30.4 ppm ≈ 148.29 µM) compared to one previous study (0.61 µM isoproturon; (8)) could be further increased to <30%.

Literaturliterature

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Claims (22)

1. Verfahren zum Abbau von Xenobiotika durch Mikroorganismen, dadurch gekennzeichnet, daß der Abbau durch eine physiologisch kompatible Kombination mindestens einer Pilzart mit Monooxygenase-/Dioxygenase-Aktivität und mindestens einer Pilzart mit Glutathion-S-Transferase-Aktivität durchgeführt wird.1. Process for the degradation of xenobiotics by microorganisms, characterized in that the degradation is carried out by a physiologically compatible combination of at least one type of fungus with monooxygenase / dioxygenase activity and at least one type of fungus with glutathione-S-transferase activity. 2. Verfahren nach Anspruch 1, bei dem mindestens eine der Pilzarten Trametes versicolor, Pleurotus ostreatus und Phanerochaete chrysosporium als Pilzart mit Monooxygenase-/Dioxygenase-Aktivität eingesetzt wird.2. The method according to claim 1, in which at least one of the mushrooms Trametes versicolor, Pleurotus ostreatus and Phanerochaete chrysosporium as a type of mushroom with Monooxygenase / dioxygenase activity is used. 3. Verfahren nach Anspruch 1 oder 2, bei dem mindestens eine Pilzart der Klassen Basidiomycotina, Deuteromycotina oder Zygomycotina als Pilzart mit Glutathion-S- Transferase-Aktivität eingesetzt wird.3. The method according to claim 1 or 2, in which at least one mushroom type of the classes Basidiomycotina, Deuteromycotina or Zygomycotina as a fungus with glutathione-S- Transferase activity is used. 4. Verfahren nach Anspruch 3, bei dem mindestens eine Pilzart der Klasse Zygomycotina als Pilzart eingesetzt wird.4. The method according to claim 3, wherein at least one type of mushroom of the class Zygomycotina is used as a type of mushroom. 5. Verfahren nach Anspruch 4, bei dem mindestens eine der Pilzarten Cephalosporium, Penicillium, Trichoderma und Mucor eingesetzt wird.5. The method according to claim 4, wherein at least one of the mushroom types Cephalosporium, Penicillium, Trichoderma and Mucor is used. 6. Verfahren nach Anspruch 5, bei dem die Pilzart Mucor hiemalis f. irnsingii eingesetzt wird.6. The method according to claim 5, wherein the mushroom type Mucor hiemalis f. irnsingii is used. 7. Verfahren nach einem der vorhergehenden Ansprüche, bei dem eine Kombination von Phanerochaete chrysosporium und Mucor hiemalis f. irnsingii eingesetzt wird.7. The method according to any one of the preceding claims, in which a combination of Phanerochaete chrysosporium and Mucor hiemalis f. irnsingii is used. 8. Verfahren nach Anspruch 1-7, das in einem Temperaturbereich von 0,3 bis 50°C durchgeführt wird. 8. The method according to claim 1-7, which is in a temperature range of 0.3 to 50 ° C. is carried out.   9. Verfahren nach Anspruch 8, das bei Raumtemperatur (15-25°C) durchgeführt wird.9. The method of claim 8, which is carried out at room temperature (15-25 ° C). 10. Verfahren nach Anspruch 8, das bei Grundwassertemperatur (7-12°C) durchgeführt wird.10. The method according to claim 8, which is carried out at groundwater temperature (7-12 ° C) becomes. 11. Verfahren nach Anspruch 1-10, bei dem die mindestens eine Pilzart mit Monooxygenase-/Dioxygenase-Aktivität und die mindestens eine Pilzart mit Glutathion-S-Transferase-Aktivität dem zu entgiftenden Medium simultan zugesetzt werden.11. The method according to claim 1-10, wherein the at least one type of mushroom with Monooxygenase / dioxygenase activity and the at least one type of fungus Glutathione-S-transferase activity simultaneously with the medium to be detoxified be added. 12. Verfahren nach Anspruch 1-10, bei dem dem zu entgiftenden Medium zuerst die mindestens eine Pilzart mit Glutathion-S-Transferase-Aktivität und dann die mindestens eine Pilzart mit Monooxygenase-/Dioxygenase-Aktivität zugesetzt werden.12. The method according to claim 1-10, wherein the medium to be detoxified first at least one type of fungus with glutathione S-transferase activity and then the at least one type of fungus with monooxygenase / dioxygenase activity was added become. 13. Verfahren nach einem der vorhergehenden Ansprüche, bei dem der Abbau in C- und/oder N-Mangelmedien durchgeführt wird.13. The method according to any one of the preceding claims, wherein the degradation in C- and / or N-deficiency media is carried out. 14. Zusammensetzung zum Abbau von Xenobiotika, die eine physiologisch kompatible Kombination von mindestens einer Pilzart mit Monooxygenase-/Dioxygenase- Aktivität und mindestens einer Pilzart mit Glutathion-S-Transferase-Aktivität enthält.14. Composition for the degradation of xenobiotics, which is a physiologically compatible Combination of at least one type of mushroom with monooxygenase / dioxygenase Activity and at least one type of fungus with glutathione-S-transferase activity contains. 15. Zusammensetzung nach Anspruch 14, die mindestens eine der Pilzarten Trametes versicolor, Pleurotus ostreatus und Phanerochaete chrysosporium als Pilzart mit Monooxygenase-/Dioxygenase-Aktivität enthält.15. The composition according to claim 14, which is at least one of the fungi Trametes versicolor, Pleurotus ostreatus and Phanerochaete chrysosporium as a type of mushroom with Contains monooxygenase / dioxygenase activity. 16. Zusammensetzung nach Anspruch 14 oder 15, bei der mindestens eine Pilzart der Klassen Basidiomycotina, Deuteromycotina oder Zygomycotina als Pilzart mit Glutathion-S-Transferase-Aktivität eingesetzt wird.16. The composition of claim 14 or 15, wherein at least one type of mushroom Classes Basidiomycotina, Deuteromycotina or Zygomycotina as a type of mushroom with Glutathione-S-transferase activity is used. 17. Zusammensetzung nach Anspruch 16, bei der mindestens eine Pilzart der Klasse Zygomycotina als Pilzart mit Glutathion-S-Transferase eingesetzt wird. 17. The composition of claim 16, wherein at least one type of mushroom of the class Zygomycotina is used as a fungus with glutathione-S-transferase.   18. Zusammensetzung nach Anspruch 17, bei der mindestens eine der Pilzarten Cephalosporium, Penicillium, Trichoderma und Mucor eingesetzt wird.18. The composition of claim 17, wherein at least one of the mushroom species Cephalosporium, Penicillium, Trichoderma and Mucor is used. 19. Zusammensetzung nach Anspruch 18, bei der Mucor hiemalis f. irnsingii eingesetzt wird.19. The composition of claim 18, wherein the Mucor hiemalis f. irnsingii used becomes. 20. Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 14-19, bei der eine Kombination von Phanerochaete chrysosporium und Mucor hiemalis f. irnsingii eingesetzt wird.20. The composition according to any one of claims 14-19, wherein a combination of Phanerochaete chrysosporium and Mucor hiemalis f. irnsingii is used. 21. Verwendung einer Zusammensetzung nach Anspruch 14-20 zum Abbau von Xenobiotika.21. Use of a composition according to claim 14-20 for the degradation of Xenobiotics. 22. Verwendung nach Anspruch 21 zum Abbau von Xenobiotika in Grundwasser, Kläranlagen, Abwässern, Müll, Ackerböden, Flugaschen, Industrieböden und Industrieluft.22. Use according to claim 21 for the degradation of xenobiotics in groundwater, Sewage treatment plants, sewage, garbage, arable soils, fly ash, industrial soils and Industrial air.
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